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一文即可知道期刊对Western Blot数据要求

2018年,PubMed 中共有194,262 篇蛋白相关的论文,其中有16,196(8.3%)篇用到了 WB。WB 的使用比例在过去30年中稳定在8%到9%左右,而更为现代和准确的蛋白质谱技术(MS),在过去十年中应用比例则稳定在4%,仅仅是WB的一半。四十年后的今天,WB依旧是应用率最高的蛋白质分析技术。但是重现性和稳定性的问题,也使Western Blot技术处在风口浪尖上。因此2014年,美国国立卫生研究院提倡提高科研重现性,呼吁研究界、科学出版商、大学、工业界和其他领域推动这一变化。率先响应的期刊有Science,Cell,Nature和JBC。那让我们来看看期刊都有哪些具体要求:



一、不建议跑平行胶,因为平行胶和剥离膜孵育体系,操作条件的不一致,影响定量的准确性,因此最好内参和目的蛋白要在同一张印迹膜上。



二、选择宽动态范围的方法,确认信号强度与所上样量之间的线性关系,例如用胶片做化学发光方法的动态范围就很窄,不建议使用。



三、强烈推荐使用总蛋白进行归一化,因为看家蛋白容易受处理条件影响而发生变化,影响定量的结果,使用总蛋白定量更真实地反映目标蛋白表达量的变化。


四、提交原始数据,例如:JBC,PLOS和CELL等杂志都要求要提供原始数据。

 


Azure Sapphire多光谱激光成像系统如何满足期刊要求


☑  Sapphire是多荧光检测系统,可多达4个激光光源,同时进行4通道荧光检测,获得更快的工作流程和更可靠的定量数据。

☑   Sapphire配合AzureRed总蛋白荧光染色剂可以做总蛋白归一化和定量三个靶标蛋白,生成可以信赖的定量Western Blotting数据。

☑   Sapphire配有独特的三种检测器设计,最大限度地提高仪器的检测动态范围,保证结果的准确性。



☑   Sapphire提供原始数据16bit的tiff图给到期刊,这里的tiff原始数据是指未经裁剪,像素修改,对比度调整等任何操作的图,保证结果的真实性和可靠性。