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深蓝云直播课堂 | 单重PCR到多重PCR实验设计

PCR技术以特异性的寡核苷酸引物放大扩增特定的DNA片段,一对引物在单次反应扩增单个基因。通常每个靶标分别进行检测,即单重PCR反应,但当我们需要检测多个靶标基因时,单重PCR费时费力同时无法排除不同样品孔间的加样差异,如内参基因的归一化检测,需要在同一反应管中检测内参基因和目标基因,多重PCR实验无疑是最简单直接的解决方案。

多重PCR也称复合PCR,是在常规PCR基础上改进并发展起来的一种PCR扩增技术,即可在一个反应体系中加入两对以上引物,同时扩增出多个核酸片段。在荧光定量PCR(qPCR)和数字PCR(digital PCR)技术中,多重PCR设计配合多荧光通道可以进行更多靶标的相对于标准品的检测和直接的绝对定量检测,既具有单重PCR的敏感性和特异性,同时又比单重PCR更加高效、快捷和经济。

多重PCR实验具体如何进行?又有哪些注意事项?实时荧光定量PCR和数字PCR如何和多重PCR结合?北京深蓝云生物科技有限公司云课堂将为您答疑解惑。

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